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高首鱘虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)液的配制方法

來(lái)源: 上海一研生物科技有限公司    2020年10月08日 14:07  
  高首鱘虹彩病毒PCR檢測(cè)試劑盒反應(yīng)液的配制
 
  PCR反應(yīng)體系的配置方式有時(shí)也會(huì)影響反應(yīng)的正常進(jìn)行。常規(guī)方法與其它酶學(xué)反應(yīng)一樣,在后加入DNA聚合酶。早期的PCR儀沒(méi)有帶加熱的蓋子,要求在反應(yīng)液上覆蓋一層礦物油,防止水分蒸發(fā)。
 
  對(duì)于使用具3’-5’外切活性的高溫DNA聚合酶時(shí),有時(shí)會(huì)擴(kuò)增不出產(chǎn)物。在遇到這個(gè)問(wèn)題時(shí),如果將反應(yīng)成分分開(kāi)配制,A管含模板、引物和dNTP,以及調(diào)整體積的H2O,B管含緩沖液、DNA聚合酶和水,然后再將兩管溶液混合起來(lái),可較好地克服這個(gè)問(wèn)題。
 
  按照常規(guī)的方法配制反應(yīng)體系,有時(shí)會(huì)出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增的問(wèn)題。熱啟動(dòng)(hotstart)PCR操作方式可較好解決這一問(wèn)題。將dNTP、緩沖液,Mg2+和primer先配制好,然后加入一粒蠟珠(如AmpliWaxPCRQam100),加熱熔化,再冷卻,使蠟將溶液封住,后加入模板和DNA聚合酶等剩余成分。只有當(dāng)PCR反應(yīng)進(jìn)入高溫階段后,蠟層熔化,所有反應(yīng)成分才會(huì)混合在一起。
 
  已開(kāi)封或者使用后,剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,ELISA檢測(cè)試劑盒開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
 
  根據(jù)我司規(guī)定未開(kāi)封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請(qǐng)注意,收到試劑盒后請(qǐng)盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A、檢測(cè)溶液B以及96孔板保存于-20℃。

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