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R0010 高效RIPA裂解液(組織/細(xì)胞)

參考價140.00-1200.00
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海索寶生物科技有限公司
  • 品牌 Solarbio索萊寶
  • 型號 R0010
  • 所在地 北京市
  • 廠商性質(zhì) 代理商
  • 更新時間 2024/3/18 9:44:09
  • 訪問次數(shù) 85
規(guī)格
20ml140.00元999 瓶可售
100ml400.00元999 瓶可售
500ml1200.00元999 瓶可售

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高效RIPA裂解液(組織/細(xì)胞)
別名:蛋白提取試劑盒
英文名稱:RIPA buffer(high)
規(guī)格:20ml ; 100ml ; 500ml
外觀(性狀):黃色澄清液體
儲存條件:附件PMSF-20℃,裂解液4℃。有效期1年
單位:瓶

詳細(xì)信息 在線詢價

運輸溫度:常溫運輸


       本品為高效RIPA裂解液(組織/細(xì)胞)。主要用于從動物組織和動物細(xì)胞中抽取的可溶性蛋白。組織活細(xì)胞本產(chǎn)品配有一支PMSF(0.3ml/1.5ml),PMSF請于-20℃保存。


使用說明

      如發(fā)現(xiàn)RIPA有沉淀,請放室溫半小時或者常溫水浴使沉淀溶解。

      根據(jù)使用量,取每1ml RIPA 加入10ul PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM。混勻備用 (PMSF現(xiàn)用現(xiàn)加)。

       1、樣品前處理:

a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。

b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把組織剪切成細(xì)小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。

用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

       2、后處理:

將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。


高效RIPA裂解液(組織/細(xì)胞)注意事項 :

       本試劑為強烈型裂解液,可以提取核蛋白,但在提取核蛋白的同時,也會將基因組一并釋放出來,造成細(xì)胞裂解液粘稠,此時可以直接加入蛋白上樣緩沖液,煮沸再離心,離心后直接上樣電泳;若想測定濃度,可入加少量 SDS(1%),煮沸后離心測濃度。本系列蛋白提取試劑所提取的蛋白由于含有去污劑,所以不適合使用Bradford蛋白濃度測定試劑盒,請選擇BCA法或者Lowry法檢測蛋白濃度。

       如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散粘稠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。


上海索寶生物科技有限公司

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手機(jī):17801761073

聯(lián)系人:龔思雨

電話:010-50973130

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