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ATH-CHO-HCP CHO宿主細(xì)胞殘留蛋白ELISA試劑盒

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宿主細(xì)胞殘留蛋白HCP是用來(lái)定量分析以中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(CHO)為表達(dá)細(xì)胞的生物藥物中宿主蛋白雜質(zhì)的試劑盒。

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中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞宿主蛋白酶聯(lián)檢測(cè)試劑盒是用來(lái)定量分析以中國(guó)倉(cāng)鼠卵 巢細(xì)胞(Chinese Hamster Ovary cells,CHO)為表達(dá)細(xì)胞的生物藥物中宿主蛋白 雜質(zhì)的試劑盒。首先,用不同濃度的CHO標(biāo)準(zhǔn)蛋白制作一條標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后再根 據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)分析生物藥物中宿主細(xì)胞殘留蛋白的含量。具體方法為:先將CHO 標(biāo)準(zhǔn)蛋白或者待測(cè)樣品適當(dāng)稀釋后加入已包被好抗CHO宿主蛋白抗體的96孔平 板中。經(jīng)過(guò)1.5小時(shí)的保溫,宿主細(xì)胞蛋白與已經(jīng)固定在平板上的抗體結(jié)合形成 抗原-抗體復(fù)合物。此復(fù)合物被隨后加入的生物素標(biāo)記的抗CHO宿主蛋白的抗體 結(jié)合并進(jìn)一步形成更高級(jí)的復(fù)合物,反應(yīng)45分鐘后洗去未結(jié)合的物質(zhì)。再加入鏈 霉親合素-辣根過(guò)氧化物酶復(fù)合物,靜置30分鐘。因鏈霉親合素可以與任何帶生 物素標(biāo)記的抗體相結(jié)合,從而使鏈霉親合素-辣根過(guò)氧化物酶復(fù)合物連接到平板 上。接下來(lái)沖洗掉未結(jié)合的物質(zhì),加入TMB底物。固相上的酶催化底物產(chǎn)生顏色 反應(yīng),待顏色反應(yīng)一段時(shí)間后,終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定其結(jié)果, 此結(jié)果能間接地反應(yīng)結(jié)合到平板上的的宿主細(xì)胞蛋白數(shù)量的多少。根據(jù)CHO宿主 蛋白標(biāo)準(zhǔn)曲定量分析生物藥物中宿主細(xì)胞殘留蛋白的含量。

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