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如何修煉成流式高手 -方案設(shè)計(jì)（上）
我們時(shí)常會(huì)遇到，明明染色Marker都來自一篇文獻(xiàn)，但是后實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻變成“買家秀與賣家秀”。
產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因是什么？以及我們?yōu)槭裁匆绾蝺?yōu)化我們的染色方案呢？我們先看具體的例子。
方案1與方案2，所選擇的marker都*一致，所選用的熒光素種類一樣，但是搭配不一樣。那么我們看看同一個(gè)樣本，后各個(gè)細(xì)胞亞群的結(jié)果一樣嗎？
方案1與方案2，CD4+CD25+ 的百分比接近(A與C比較)，可是CD8+CD69+的百分比卻相差很多(C與D比較)。
造成這種原因其實(shí)就是我們平時(shí)說到到spreading現(xiàn)象。
Nguyen, Richard, et al. "Quantifying spillover spreading for comparing instrument performance and aiding in multicolor panel design." Cytometry Part A 83.3 (2013): 306-315.
如果要優(yōu)化流式染色方案中，由spreading現(xiàn)象產(chǎn)生的分辨率降低，我們可以使用SWOFF方法。通過如下流程，就可以很快找出究竟是由于那個(gè)通道的配色不合理，導(dǎo)致分辨能力下降。
在不同的檢測(cè)平臺(tái)，元件的光電轉(zhuǎn)化效率會(huì)直接影響儀器總體分辨率。
不僅如此，科技的進(jìn)步帶來的還有更小的spreading現(xiàn)象，這使得配色也更加的輕松，結(jié)果也更加的準(zhǔn)確。
你想知道如何檢查自己的染色方案么？利用SWOFF的方法，可以幫您發(fā)現(xiàn)并且優(yōu)化，使檢測(cè)更加準(zhǔn)確。點(diǎn)擊下方閱讀全文，獲取SWOFF的詳細(xì)步驟。
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