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【儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】分子熒光光譜儀可以進(jìn)行樣品的定性分析與定量分析。目前，熒光分析多數(shù)用于熒光物質(zhì)的定量分析。常用的定量方法有工作曲線法、直接比較法和內(nèi)標(biāo)法。
分析方法
(1)定性方法：
不同分子結(jié)構(gòu)的各種熒光物質(zhì)，具有不同的激發(fā)光譜(吸收光譜)和熒光光譜，這是分子熒光分析的定性依據(jù)。
在一定實(shí)驗(yàn)條件下，用熒光分光光度計(jì)作試樣和標(biāo)樣的激發(fā)光譜和熒光光譜，然后比較它們的光譜圖，即可鑒定試樣物質(zhì)。
(2)定量方法：
1.工作曲線法
先配一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液并分別測(cè)定其熒光值，然后將減去試劑空白熒光值的標(biāo)準(zhǔn)溶液熒光值與其相應(yīng)濃度作圖，即其工作曲線。
根據(jù)試液及試液空白熒光值，在此曲線上即可找到試液的濃度。同時(shí)根據(jù)工作曲線的線性情況，可確定試液的濃度范圍上限。
2.直接比較法
試樣和標(biāo)樣溶液的濃度比=(試樣熒光值-試樣本底熒光值)/(標(biāo)樣熒光值-標(biāo)樣本底熒光值)
直接比較法簡(jiǎn)單快速，它要求被測(cè)樣品 濃度與其相應(yīng)的熒光值必須處于線性范圍內(nèi)。
3.內(nèi)標(biāo)法
試樣和標(biāo)樣溶液的濃度比=(試樣熒光值-試樣本底熒光值)/(試樣加標(biāo)樣的混合溶液熒光值-試樣熒光值)
用內(nèi)標(biāo)法時(shí)，由于試樣和標(biāo)樣的熒光值 是在相同體系中測(cè)定的 ，因此可消除試樣中 某些雜質(zhì)熒光的干擾 。
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