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SM0020 線粒體提取試劑盒

參考價400.00-660.00
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱 上海索寶生物科技有限公司
  • 品牌 Solarbio索萊寶
  • 型號 SM0020
  • 所在地 北京市
  • 廠商性質 代理商
  • 更新時間 2024/4/9 14:16:21
  • 訪問次數 82
規(guī)格
50T400.00元999 件可售
100T660.00元999 件可售

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線粒體提取試劑盒
英文名稱
mitochondrial extraction kit
規(guī)格
50T ; 100T
儲存條件
四周內使用可4℃儲存,長期保存請置于-20℃。冰袋運輸
單位

詳細信息 在線詢價

線粒體提取試劑盒

線粒體提取試劑盒

操作步驟:

1. 樣本處理 a. 組織勻漿:稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等,PBS或生理鹽水沖洗,洗凈血水,濾紙吸干,用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內。加入1.0 mL冰預冷的Lysis Buffer,0℃冰浴上下研磨組織20次; b. 培養(yǎng)細胞勻漿:消化細胞,PBS洗滌,800g離心5~10 min收集細胞,計數。每次提取需要5×107個細胞,加入1.0 mL冰預冷的Lysis Buffer重懸細胞,將細胞懸液轉移到小容量玻璃勻漿器內,0℃冰浴研磨30~40次。

2. 將組織或細胞勻漿物轉移到離心管,4℃,1000g 離心5 min。

3. 取上清,轉移至新的離心管中,4℃,1000g再次離心5 min。

4. 取上清,轉移至新的離心管中,4℃, 12,000 g 離心10 min。離心后的上清含胞漿成分,可從中提取胞漿蛋白。將上清轉移到新離心管,線粒體沉淀在管底。

5. 往線粒體沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重懸線粒體沉淀,4℃,1000 g 離心5 min。

6. 取上清,轉移至新的離心管中,4℃, 12,000 g 離心10 min。棄上清,高純度的線粒體沉淀在管底。

7. 用50 -100μL Store Buffer 或合適的反應緩沖液重懸線粒體沉淀,立即使用或-70℃保存。

注意事項:

1. 為保證獲得完整的線粒體,務必做到:第一,全程低溫操作;第二,快速;第三,在不破壞亞細胞器的情況下破碎細胞,這是制備線粒體的最關鍵環(huán)節(jié)。與組織塊相比,培養(yǎng)細胞特別是貼壁培養(yǎng)細胞在用玻璃勻漿器勻漿時較難破壁,因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴密的研杵上下研磨培養(yǎng)細胞。

2. 以離心力g計算正確的離心速度,不同的離心機可據此精確計算離心速度。

3. 進行Western Blot和2D-膠電泳,可直接加入上樣緩沖液裂解線粒體。 

轉速與離心力換算:1.11×10^(-5)×R×(rpm)^2 G為離心力,一般以g(重力加速度)的倍數來表示;

[rpm]即:轉速的平方; 

R為半徑,單位為厘米。


上海索寶生物科技有限公司

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手機:17801761073

聯(lián)系人:龔思雨

電話:010-50973130

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